Unidad de Citometría y Microscopia

La citometría de flujo ha supuesto un importante avance en múltiples áreas: clínica, clínica-investigación, investigación e industria. La capacidad de realizar un análisis paramétrico sobre una particular población celular nos permite una identificación precisa y rápida de la misma. La separación celular permite conjugar el poder del análisis multiparamétrico con la selección y separación de un determinado tipo celular para ser utilizado en otras muchas aplicaciones: cultivo celular, PCR, Western blot, estudios cinéticos, etc.

En los citómetros de flujo analizadores y separadores básicamente un haz de laser intercepta una única célula en un punto concreto generando una dispersión de luz en parte debida al tamaño relativo celular y a la granularidad celular y por otra parte debida a luz fluorescente generada al utilizar para identificar poblaciones con anticuerpos y/o colorantes que absorben la luz del láser y emiten en consecuencia fluorescencia. En el caso de los separadores celulares esas características multiparamétricas permiten seleccionar una determinada población y separarla de la original con criterios de máxima pureza o máxima recuperación. Los modernos separadores incluso permiten la separación de una única célula por pocillo con módulos especialmente diseñados a tal efecto.

La unidad de Citometría de Flujo está situada dentro de las instalaciones de Inbiomed y ha sido creada a principios del 2010. La unidad permite a los investigadores básico-clínicos del Instituto y del entorno la capacidad de análisis multiparamétricos y separación de poblaciones celulares basadas en su fenotipo y características moleculares. La unidad de citometría está compuesta de Citómetro de Flujo Analizador, Separadores celulares y Microscopía Digital Confocal.

La Unidad como Servicio

La unidad de Citometría ofrece el servicio de separación celular manejado exclusivamente por el personal responsable de la unidad. El citómetro de flujo Analizador y la Microscopía Digital Confocal se encuentra en régimen de autoservicio única y exclusivamente para usuarios experimentados.

La Unidad como Docente

La unidad se encarga de la formación continuada de aquellos usuarios que así lo requieran ofreciendo cursos de formación, monográficos y seminarios de asistencia interna y externa. En breve se podrá acceder a programas de formación y calendario de seminarios futuros. Asimismo ofrece servicio de consultoría y asesoramiento tanto a nivel interno como a usuarios externos.

La Unidad y la Investigación

La unidad de citometría es uno de los servicios de soporte al centro así como de sus investigadores y líneas de investigación. La unidad de citometría tiene como objetivos en este área, el desarrollo y puesta a punto de protocolos y nuevas técnicas al servicio de la investigación en el área de células madre.

Equipamiento disponible

Citómetro de flujo analizadores:
- FACScalibur (Becton Dickinson). Láser de Argón (488 nm) y diodo rojo (635 nm) capaz de medir cuatro fluorescencias simultáneamente.
- FACS Canto A (Becton Dickinson). Láser de Argón (488 nm) y diodo rojo (635 nm) capaz de medir seis fluorescencias simultáneamente.
Separadores Celulares automatizados:
- FACSAria III (Becton Dickinson). Láser rojo (633) y azul (488) con ACDU (Automated Cell Deposition Unit) incorporada, separación de cuatro poblaciones de forma simultánea.
- AutoMACS (Miltenyi Biotec): Separador Celular Inmunomagnético.
Microscopía Digital Confocal:
- Microscopio Zeiss LSM510 Meta, 3 Laser (488, 550 y 633) más un UV laser. Video-microscopía in vivo con Cámara de cultivo con gases (CO2). Cámara y Luz Trasmitida.

Personal

Responsable de Unidad: María Paz López Mato (mplopez@inbiomed.org)
Personal Técnico: Ariane Aduriz Berasategui.